[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: دوره 7، شماره 2 - ( سال هفتم، شماره دوم، تابستان 1398 ) ::
دوره 7 شماره 2 مجله دانشکده علوم پزشکی نیشابور - صفحه 15 - 22 برگشت به فهرست نسخه ها
طراحی و بهینه‌سازی سیستم الایزای نقطه‌ای (Dot-blot ELISA) با آنتی‌ژن‌های اختصاصی برای تشخیص ساده و سریع مشمشه
سجاد یزدان ستاد1 ، نادر مصوری* 2، کیوان تدین3 ، دکتر ایرج مهرگان1
1- گروه زیست شناسی، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران
2- بخش توبرکولین و مالئین، موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، کرج، ایران ، nmosavari@gmail.com
3- بخش واکسن های باکتریایی هوازی دامپزشکی، موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، کرج، ایران
چکیده:   (934 مشاهده)
مقدمه
مشمشه از قدیمی‌ترین بیماری‌های واگیر خطرناک و مشترک بین انسان و حیوان است که با ظهور جراحات گرانولوماتوزی قرحه‌ای در پوست و غشاهای مخاطی مشخص می‌شود. با توجه به گزارش حتی یک مورد بیماری و لزوم جلوگیری از انتشار آن با شناسایی و معدوم‌سازی میزبان‌های آلوده، شناسایی زودهنگام بیماری با روش‌های حائز حساسیت و ویژگی قابل قبول، از اهمیت بالایی برخوردار است. مطالعۀ حاضر به ‌منظور طراحی و بهینه‌سازی سیستم الایزای نقطه‌ای (Dot-blot ELISA) با آنتیژنهای اختصاصی جهت تشخیص ساده و سریع مشمشه در نمونه‌های سرمی اسب‌سانان انجام گرفت.
مواد و روش‌ها
سویه‌های بورخولدریا مالئی در محیط مایع نوترینت همراه با گلیسیرول 4 درصد کشت داده شدند. آنتی‌ژن‌های کل سلول باکتری با استفاده از روش سونیکاسیون و ترسیب با تری‌کلرو استیک اسید (TCA) استخراج شد. غلظت بهینه آنتی‌ژن-آنتی‌بادی با روش تیتراسیون چکر بورد معین شد. آنتی‌ژن باکتری روی کاغذ نیتروسلولز مفروش و بعد از متوقف‌سازی با شیرخشک، سرم حیوان مشکوک و سپس آنتی‌بادی کونژوگه شده با HRP اضافه گردید و با استفاده از سوبسترای TMB، سیگنال‌ها رهگیری شد.
یافته‌ها
تعداد 4 نمونه از 90 نمونۀ سرم با استفاده از آزمون الایزای نقطه‌ای، مثبت گزارش شد. ویژگی و حساسیت آزمون، به‌ترتیب 96/62 و 100 درصد برآورد گردید. کشت و جداسازی بورخولدریا مالئی از نمونه‌های بالینی حیوان، اعتبار تست را تایید کرد.
نتیجه‌گیری
یافته­‌ها نشان داد روش الایزای نقطه‌ای حائز حساسیت، ویژگی و دقت بالا در تشخیص مشمشه بوده و به‌ دلیل سرعت، سهولت تفسیر بدون نیاز به ابزار خاص، مقرون به‌صرفه بودن و قابلیت کاربردی صحرایی آن، روش کاربردی و کارآمد می­‌باشد.
واژه‌های کلیدی: بورخولدریا مالئی، مشمشه، الایزای نقطه‌ای، آنتی‌بادی
متن کامل [PDF 1232 kb]   (202 دریافت)    
نوع مطالعه: مقالات کوتاه | موضوع مقاله: دامپزشکی
دریافت: ۱۳۹۸/۲/۲۴ | ویرایش نهایی: ۱۳۹۸/۴/۱۵ | پذیرش: ۱۳۹۸/۳/۲۰ | انتشار الکترونیک پیش از انتشار نهایی: ۱۳۹۸/۳/۲۱ | انتشار: ۱۳۹۸/۴/۱۵ | انتشار الکترونیک: ۱۳۹۸/۴/۱۵
ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

CAPTCHA


XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Yazdansetad S, Mosavari N, Tadayon K, Mehregan I. Design and optimization of Dot-blot ELISA system using specific antigens for simple and rapid diagnosis of glanders. J Neyshabur Univ Med Sci. 2019; 7 (2) :15-22
URL: http://journal.nums.ac.ir/article-1-729-fa.html

یزدان ستاد سجاد، مصوری نادر، تدین کیوان، مهرگان ایرج. طراحی و بهینه‌سازی سیستم الایزای نقطه‌ای (Dot-blot ELISA) با آنتی‌ژن‌های اختصاصی برای تشخیص ساده و سریع مشمشه. مجله دانشکده علوم پزشکی نیشابور. 1398; 7 (2) :15-22

URL: http://journal.nums.ac.ir/article-1-729-fa.html



دوره 7، شماره 2 - ( سال هفتم، شماره دوم، تابستان 1398 ) برگشت به فهرست نسخه ها
مجله علوم پزشکی نیشابور J Neyshabur Univ Med Sci

*** هرگونه کپی برداری از این سایت بدون ذکر منبع غیر قانونی و همراه با پیگیری های قضایی می باشد *** مجله دانشکده علوم پزشکی نیشابور *** Any copying of this site without citing the source is illegal And is associated with the pursuit of justice ***

Persian site map - English site map - Created in 0.24 seconds with 31 queries by YEKTAWEB 3977