[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: ::
برگشت به فهرست مقالات برگشت به فهرست نسخه ها
طراحی و بهینه‌سازی سیستم الایزای نقطه‌ای (Dot-blot ELISA) با آنتی‌ژن‌های اختصاصی برای تشخیص ساده و سریع مشمشه
آقای سجاد یزدان ستاد1 ، دکتر نادر مصوری* 2، دکتر کیوان تدین3 ، دکتر ایرج مهرگان1
1- گروه زیست شناسی، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران
2- بخش توبرکولین و مالئین، موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، کرج، ایران ، nmosavari@gmail.com
3- بخش واکسن های باکتریایی هوازی دامپزشکی، موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، کرج، ایران
چکیده:   (76 مشاهده)
مقدمه
مشمشه یکی از قدیمی‌ترین بیماری‌های واگیر خطرناک و مشترک بین انسان و حیوان است که با ظهور جراحات گرانولوماتوزی قرحه‌ای در پوست و غشاهای مخاطی مشخص می‌شود. شناسایی زودهنگام بیماری با روش‌های حائز حساسیت و ویژگی قابل قبول با توجه به گزارش حتی یک مورد بیماری و جلوگیری از انتشار آن با شناسایی و معدوم‌سازی میزبان‌های آلوده از اهمیت بالایی برخوردار است. مطالعۀ حاضر به‌منظور طراحی و بهینه‌سازی سیستم الایزای نقطه‌ای با آنتی‌ژن‌های اختصاصی جهت تشخیص ساده و سریع مشمشه در نمونه‌های سرمی اسب‌سانان انجام گرفت.
مواد و روش‌ها
سویه‌های بورخولدریا مالئی در محیط مایع نوترینت همراه با گلیسیرول %4 کشت داده شدند. آنتی‌ژن‌های کل سلول باکتری با استفاده از روش سونیکاسیون و ترسیب با تری‌کلرو استیک اسید (TCA) استخراج شد. غلظت بهینه آنتی‌ژن-آنتی‌بادی با روش تیتراسیون چکر بورد معین شد. آنتی‌ژن باکتری روی کاغذ نیتروسلولز مفروش و بعد از متوقف‌سازی با شیرخشک، سرم حیوان مشکوک و سپس آنتی‌بادی کونژوگه شده با HRP اضافه گردید و با استفاده از سوبسترای TMB، سیگنال‌ها رهگیری شد.
یافته‌ها و نتیجه‌گیری
تعداد 4 نمونه از 90 نمونۀ سرم با استفاده از آزمون الایزای نقطه‌ای، مثبت گزارش شد. ویژگی و حساسیت آزمون، به‌ترتیب 62/96 و 100 درصد برآورد گردید. کشت و جداسازی بورخولدریا مالئی از نمونه‌های بالینی حیوان، اعتبار تست را تایید کرد. مطالعۀ ما نشان داد که روش الایزای نقطه‌ای حائز حساسیت، ویژگی و دقت بالا در تشخیص مشمشه بوده و به‌دلیل سرعت، سهولت تفسیر بدون نیاز به ابزار خاص، مقرون به‌صرفه و قابلیت کاربردی صحرایی آن، روش کاربردی و کارآمد به‌نظر می‌رسد.
واژه‌های کلیدی: بورخولدریا مالئی، مشمشه، الایزای نقطه‌ای، آنتی‌بادی
     
نوع مطالعه: مقالات کوتاه | موضوع مقاله: دامپزشکی
دریافت: ۱۳۹۸/۲/۲۴ | ویرایش نهایی: ۱۳۹۸/۳/۲۱ | پذیرش: ۱۳۹۸/۳/۲۰ | انتشار الکترونیک پیش از انتشار نهایی: ۱۳۹۸/۳/۲۱
ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

CAPTCHA code


XML   English Abstract   Print



برگشت به فهرست مقالات برگشت به فهرست نسخه ها
مجله علوم پزشکی نیشابور J Neyshabur Univ Med Sci

*** هرگونه کپی برداری از این سایت بدون ذکر منبع غیر قانونی و همراه با پیگیری های قضایی می باشد *** مجله دانشکده علوم پزشکی نیشابور *** Any copying of this site without citing the source is illegal And is associated with the pursuit of justice ***

Persian site map - English site map - Created in 0.14 seconds with 31 queries by YEKTAWEB 3879